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[Western Blot -Western Blotting의 기술적 고려사항과 응용-] 2. Sample preparation_(3) 세포 분획화 및 면역 침전

1. Introduction▶ 2. Western Blot       - Sample preparation     3. Products   2. Sample preparation(3) 세포 분획화 및 면역 침전 특정 세포 분획(Membrane, Nucleus, Mitochondria 등)을 분리하는 것은 일반적으로 Plasma membrane protein, DNA binding protein 등 세포내 특정 위치에 분포하는 단백질을 분석하기 위한 과정으로 이를 위해 추가적인 Buffer 구성이나 Sample 처리 과정이 필요할 수 있습니다. (ex. 일반적으로 Mitochondria의 분리는 Mitochondria의 형태를 보존하고 막 파괴를 최소화하기 때문에 Dounce homogenizer를 사용합..

Protein Assay 2024.11.26 0

Myco-Read ™ Mycoplasma Detection Kit

Myco-Read™ (SMD0172)*샘플신청이 가능한 제품입니다.제품설명 Myco-Read™ Mycoplasma PCR Detection Kit는 PCR을 통하여 배양된 Cell로부터 Mycoplasma의 오염 여부를 검증하기 위한 목적으로 만들어진 제품입니다. Mycoplasma는 현미경으로 관찰이 어려워 감염 여부를 판별하기 쉽지 않으며, 일단 감염이 되면 Cell 성장 및 염색체 이상, 세포의 형태에 영향을 끼칩니다. Myco-Read™ Mycoplasma PCR Detection Kit는 분자생물학적 종 분류 방법인 16S rRNA를 이용하는 방식으로, 분류하고자 하는 종의 16S rRNA Sequence의 Primer를 사용하여 PCR을 통해 약 8 속 209종의 Mycoplasma를 확인할 ..

Contamination control 2024.11.19 0

[Western Blot -Western Blotting의 기술적 고려사항과 응용-] 2. Sample preparation_(2) Protein extraction options

1. Introduction▶ 2. Western Blot       - Sample preparation     3. Products   2. Sample preparation(2) Protein extraction options○ Detergent-based Lysis 동물 세포의 용해에 가장 자주 이용되는 방법으로 세포 현탁액을 가볍게 원심분리한 후 Detergent가 포함된 Lysis solution에서 재 현탁 시키는 간단한 과정입니다. 이때 세포를 보호하던 세포막이 용해되고 내부의 세포 구성물들이 방출되게 됩니다. Fibroblast와 같은 부착성 세포의 경우 간단하게는 배양용기 내에서, 또는 Cell scraper 등으로 긁어모아 Tube에 옮긴 뒤 원심 분리 과정을 거친 후 Lysis so..

Protein Assay 2024.11.12 0

Myco-Guard™ PLUS Mycoplasma Elimination Reagent

Myco-Guard™ PLUS (SMD022P)*샘플신청이 가능한 제품입니다.제품설명 Mycoplasma는 세포벽이 결여 (Cell wall-less) 되어있는 매우 작은 세균입니다. 이러한 특징 때문에 세포 배양을 위한 시설 대다수에 감염되어 있고, 일반적인 항생제로는 치료되지 않습니다. 학계에 의하면 배양 세포주의 약 80%가량이 Mycoplasma에 감염되어 있다고 보고되고 있습니다. Mycoplasma는 다른 감염 미생물(Bacteria, Fungi)과 달리 육안으로는 세포의 성장률 변화가 없는 듯 보이지만 감염 시 숙주세포의 DNA, RNA, Protein synthesis에 영향을 미쳐 세포의 염색체와 세포 원형질막 항원 등을 변형하게 됨으로 제약회사, 연구시설, Biological produ..

Contamination control 2024.11.05 0

[Western Blot -Western Blotting의 기술적 고려사항과 응용-] 2. Sample preparation_(1) Extraction buffer

1. Introduction▶ 2. Western Blot       - Sample preparation     3. Products   2. Sample preparation (1) Extraction buffer Sample은 표적 단백질을 가용화하고 보존에 최적화하도록 조성된 완충액에서 균질화되어야 합니다. 단백질의 등전점(중전하를 띠는 pH)에 근접한 균질화 용액을 정확하게 완충(pH 7-9)하도록 하여 아미노산의 활성 잔기의 양전하 또는 음전하를 정확하게 유지함으로써 용해도를 높이고 단백질 침전을 방지하기 위해 필요합니다. Nonionic detergent(ex. Triton X-100)의 사용은 비극성 불용성 단백질의 용해도를 증가시키는 데 유리합니다. 일반적으로 단백질의 정확한 3차 또는 ..

Protein Assay 2024.10.29 0