BIOMAX

Introduction▶ 1. Western Blot       - 1-1. Sample preparation       - 1-2. Protein quantification and gel loading       - 1-3. Polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE)       - 1-4. Electrotransfer     2. Products   1-5. Blocking  WB을 수행 시 Blocking step은 항체(1st Ab 또는 2nd Ab)와 Membrane의 비특이적 결합을 방지할 수 있는 매우 중요한 과정입니다. Membrane은 Sample 단백질뿐만 아니라 항체와 같은 결합 단백질에 대해서도 높은 친화성을 갖기 때문에 적절한 Membrane bloc..

Western blotting 실험 시, 항체를 부착시키기 전 Membrane의 Blocking buffer을 사용하여 비특이적인 반응을 제거하는 것은 필수적입니다. 보통 사용되는 Skim milk는 Biotin 과 Phosphoproteins을 포함하고 있어 Phosphorylated target proteins과 Streptavidin-biotin의 검출을 방해할 수 있고 Skim milk 내에 수많은 단백질로 인해 일부 항원을 가려 Western blot의 검출에 한계가 있습니다. 또한 같은 역할로 많이 사용되는 BSA는 일반적으로 더 약한 Blocking으로 많은 비특이적 항체 결합을 유발할 수 있습니다. BIOMAX 사의 Smart-Block™5 min-Fast Blocking Buffer은 동..

Western blot을 위해 Membrane으로 Transfer된 단백질들은 비특이적 항체 결합을 방지 하기 위해 Blocking 과정을 거칩니다. Blocking buffer 제작 시 BSA, Skim milk등의 동물성 단백질을 직접 제작하거나 구매하여 사용하지만 직접 제작할 경우에는 BSA, Skim milk의 변성이 빠르게 일어나 항상 냉장 보관을 하여도 장기간 보관이 어렵고 기성품을 이용하더라도 Sodium azide 등의 보존제가 첨가되어 항원-항체 반응을 방해하여 원활한 Western blot을 방해합니다. BIOMAX 사의 Smart-Buffer™ BSA or Skim Milk Blocking Buffer는 특수 제작된 보존제를 이용하여 단백질의 오염으로 인한 변성을 예방하며 상온에서도 ..