RIPA Lysis Buffer

RIPA Buffer (BRA0500)

 

제품설명

 

일반적인 Protein Work에 사용되는 Cell Lysis Buffer입니다. RIPA Buffer는 Non-ionic과 Ionic detergent의 사용으로 세포막 뿐만 아니라 핵막까지 강력하게 Lysis 합니다. Protein을 효율적으로 Denaturation시켜 BCA Assay, SDS-PAGE 전기영동, Western Blotting 등의 후속실험 적용에 최적화된 Protein 추출이 가능합니다.

 

제품 구성 및 보관 조건

 

Compounds	Size	Storage
RIPA Buffer	500 ㎖	4℃

    * 개봉하지 않은 제품은 빛을 차단한 상태에서 보관 시 약 1년간 안정적입니다. 

 

사용 방법

 

adherent cell ① Culture media를 제거합니다. ② PBS로 Cell을 Washing 해줍니다. (2회 반복) PBS를 완전히 제거합니다. ③ 차가운 RIPA Buffer or Mild Protein Extraction Buffer 1 ㎖을 넣고 잘 돌려주어 Buffer가 고루 퍼지게 합니다.     얼음 위에서 5 min 간 유지합니다. (약 ~5x106 cell/㎖) ④ Plate 또는 Flask에서 Cell lysate를 회수하여 Microtube에 옮겨줍니다. ⑤ 4℃에서 14,000 x g로 15 min 간 원심 분리하여 Cell debris를 제거합니다. suspension cell ① 2,500 x g에서 5 min간 원심분리 후 상층액을 제거하여 Cell을 수거합니다. ② 차가운 PBS로 Cell을 washing 후 2,500 x g에서 5 min 동안 원심분리하여 Cell을 수거합니다. (2회 반복) ③ 차가운 RIPA Buffer or Mild Protein Extraction Buffer 1㎖ 넣고 Pippette으로 Cell pellet을 풀어줍니다. ④ 얼음에서 15 min 간 유지하십시오. 중간에 가볍게 Inverting합니다. ⑤ 4℃에서 14,000 x g로 15 min 간 원심 분리하여 Cell debris를 제거합니다. ⑥ 상층액을 새로운 Microtube에 옮겨 사용합니다.suspension cell

 

 

인용논문

 

1) Shin, H.-J., Koo, B.-W., Yoon, J., Kim, H., Do, S.-H., and Na, H.-S. (2022). Melatonin reduces the endoplasmic reticulum stress and polyubiquitinated protein accumulation induced by repeated anesthesia exposure in Caenorhabditis elegans. Scientific Reports 12, 5783. 10.1038/s41598-022-09853-y.